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基因敲除
進(jìn)行DNA水平編輯。一般用于構(gòu)建基因敲除鼠模型。
基因敲除
進(jìn)行DNA水平編輯。一般用于構(gòu)建基因敲除鼠模型。
CRISPR/Cas9:CRISPR/Cas9系統(tǒng)作為細(xì)菌和古細(xì)菌的獲得性免疫系統(tǒng),通過(guò)RNA介導(dǎo)特異性的切割外源遺傳物質(zhì),用以對(duì)抗入侵的病毒和質(zhì)粒。使用Cas9切口酶和一對(duì)sgRNA,兩個(gè)相近的切口造成DNA雙鏈斷裂,誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生非同源末端連接修復(fù),造成目的基因的突變。
CRISPR/Cas9技術(shù)自問(wèn)世以來(lái),取代“鋅指核酸內(nèi)切酶(ZFN)”、“類轉(zhuǎn)錄激活因子效應(yīng)物核酸酶(TALEN),成為科研、醫(yī)療等領(lǐng)域的有效工具”.一般通過(guò)體外轉(zhuǎn)錄得到sgRNA與cas9的mRNA,通過(guò)注射到原核期受精卵內(nèi),移植到假孕母鼠體內(nèi)獲得基因編輯的小鼠進(jìn)行基因功能研究。